Clonación del gen quimera tv70catl de trypanosoma vivax en un sistema bacteriano
Palabras clave:
clonación, quimera, trypanosoma vivax, Tv70CatLResumen
La tripanosomosis animal es una enfermedad parasitaria hemotrópica causada principalmente por Trypanosoma vivax (T.vivax), que ocasiona pérdidas económicas importantes en la ganadería venezolana. Hasta la fecha, el serodiagnóstico de la enfermedad está limitado por la ausencia de antígenos específicos para la identificación de T. vivax. La clonación de genes quimera de T. vivax no ha sido reportado hasta el momento y podrían ser la clave en el desarrollo de estrategias inmunoprotectivas para el control de esta enfermedad. Un gen quimera constituido por la unión de la región catalítica de la Cistein proteasa con la región de la Hsp70359-610 de T vivax, fue clonado. Para ello, se realizó la extracción del vector pPiczαA y se digirió con enzimas de restricción EcoRI y NoTI, obteniéndose la liberación del gen Tv70CatL de 1478 pb. Posteriormente, se ligó al vector de expresión pET28a y se transformó en cepas de E. coli Bl21 (DE3) por electroporación. Las colonias fueron analizadas por PCR, siendo positiva la amplificación. Luego, el producto fue digerido con enzimas de restricción EcoRV y PstI verificando así la secuencia de la molécula recombinante.
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